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新聞資訊
目前，抑郁癥已經(jīng)崛起為全球第二主要致命因素，引起了人們對抑郁癥及其動物研究的廣泛關(guān)注。針對抑郁癥的動物模型已有20多種建立方法，今天，主要跟大家分享小鼠抑郁行為模型，它是研究抑郁癥機制以及尋找新型治療方法的關(guān)鍵工具之一。
其中，懸尾實驗作為小鼠抑郁行為模型的重要組成部分，成為科學(xué)家們深入了解抑郁癥病理生理學(xué)的窗口。這一實驗?zāi)Ｐ屯ㄟ^模擬小鼠在絕望狀態(tài)中的行為表現(xiàn)，為研究人員提供了獨特的視角，使他們能夠更全面地了解抑郁癥的發(fā)病機制。本文將深入探討懸尾實驗的原理、方法以及在小鼠抑郁行為模型中的實驗流程等，旨在為抑郁癥研究領(lǐng)域提供更深層次的理論和實踐指導(dǎo)。（文末有驚喜）
簡介
小鼠的懸尾懸掛試驗（Tail Suspension Test，TST）最早是由Steru等人于1985年提出的，旨在評估小鼠的抑郁樣態(tài)。這個實驗是基于對抗抑郁藥物的研究，通過觀察小鼠在一段時間內(nèi)無法逃脫的懸掛狀態(tài)來測量其情緒狀態(tài)。懸尾懸掛試驗被廣泛應(yīng)用于研究抗抑郁藥物和理解小鼠抑郁癥狀的行為表現(xiàn)。
原理
該實驗?zāi)Ｐ屯ㄟ^將實驗動物的尾部固定，使其頭部懸掛在空中，創(chuàng)造一種困境環(huán)境。在這個環(huán)境中，動物為了擺脫困境而掙扎，然而，一旦努力無效，動物進入一種間斷性的不動狀態(tài)，表現(xiàn)出“行為絕望”狀態(tài)。
實驗的設(shè)計旨在提供一種無法逃避的壓迫環(huán)境，引導(dǎo)動物在一段時間內(nèi)通過掙扎來試圖逃離，但最終無法成功。通過記錄動物在這個過程中表現(xiàn)出的一系列參數(shù)，特別是那種典型的“不動狀態(tài)”，我們能夠觀察到動物呈現(xiàn)出類似于抑郁癥的“行為絕望狀態(tài)”。
這種模型對于抗抑郁藥物的初步篩選具有高度敏感性，而且其藥效與臨床實際的治療效果之間存在顯著的相關(guān)性。因此，懸尾實驗被廣泛運用于抗抑郁藥物的評價，為研究提供了可靠的初步數(shù)據(jù)。
研究應(yīng)用
懸尾懸掛試驗常用于評估抗抑郁藥物的療效或研究與抑郁相關(guān)的神經(jīng)機制。當(dāng)小鼠接受抗抑郁藥物治療后，其停留在懸掛狀態(tài)的時間會減少，被認為是情緒改善的表現(xiàn)。
實驗材料
懸尾懸掛試驗（Tail Suspension Test，TST）的實驗設(shè)備構(gòu)成簡單而高效的工具，用于評估小鼠的抑郁樣態(tài)。懸掛架是一根垂直支架，一般由堅固的金屬或塑料材料制成，旨在讓小鼠能夠在空中懸掛，并保持其尾巴自由懸掛。通過調(diào)整支架的高度，確保小鼠被懸掛在適當(dāng)?shù)奈恢茫蛊錈o法接觸地面或其他支撐物。
夾子或夾持裝置則被用來穩(wěn)定小鼠的尾巴，以確保在懸掛狀態(tài)下小鼠無法逃脫。這些夾子通常設(shè)計輕便而可靠，以防止對小鼠造成不適或傷害。夾子的固定位置通常設(shè)置在小鼠尾巴的基部，以確保尾巴能夠安全地固定在懸掛架上。
整個裝置的設(shè)計目的在于觀察小鼠在無法逃脫的懸掛狀態(tài)下的行為表現(xiàn)，從而評估其抑郁樣態(tài)。小鼠通常會表現(xiàn)出停止掙扎、蜷縮成一團以及無動于衷等行為，這種反應(yīng)被認為類似于抑郁狀態(tài)。實驗者能夠記錄小鼠在這種狀態(tài)下停留的時間，從而量化其抑郁樣態(tài)的程度。這一實驗設(shè)計的簡便性和高效性使其成為研究小鼠抑郁行為的重要工具。
實驗流程
①實驗準備：確保實驗室環(huán)境和設(shè)備齊備，懸掛架、夾子等操作工具正常。
②小鼠選擇：挑選健康、年齡相近的小鼠，確保實驗結(jié)果可靠。
③懸掛操作：為防止動物彼此觀察或互相影響，中間用隔板隔開；動物懸掛在隔間中間，寬度和深度足夠大，不能與墻壁接觸。
④行為觀察：記錄小鼠在懸掛狀態(tài)下的行為，特別關(guān)注抑郁癥狀。
⑤時間記錄：準確記錄小鼠停留在懸掛狀態(tài)的時間。
⑥數(shù)據(jù)分析：使用統(tǒng)計方法比較不同組別小鼠在懸掛狀態(tài)下的行為，評估藥物療效。
參考數(shù)值：
對照組小鼠懸掛時間約為5-10分鐘。
抗抑郁藥物治療組小鼠懸掛時間顯著減少，可能降至2-5分鐘。
實驗評估
懸尾懸掛試驗（Tail Suspension Test，TST）是一項動物行為學(xué)測試，被廣泛應(yīng)用于研究小鼠的抑郁樣態(tài)并評估抗抑郁藥物的效果，為科學(xué)研究提供了重要信息的窗口。
在抗抑郁藥物療效評估方面，懸尾懸掛試驗為研究人員提供了一個觀察小鼠在懸掛狀態(tài)下行為反應(yīng)的手段，從而衡量小鼠的抑郁樣態(tài)。通過觀察藥物治療后小鼠停留時間的減少趨勢，可以推斷出該藥物對緩解抑郁癥狀具有一定的效果。
懸尾懸掛試驗在研究與抑郁相關(guān)的神經(jīng)機制方面也發(fā)揮著關(guān)鍵作用。通過對小鼠在懸掛狀態(tài)下行為的觀察和記錄，研究人員能夠深入了解抑郁癥狀的發(fā)生機制，以及與神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)回路等方面的關(guān)聯(lián)。這有助于深化對抑郁癥的理解，并為尋找新的治療方法提供重要線索。
此外，懸尾懸掛試驗還廣泛應(yīng)用于研究與情緒調(diào)控相關(guān)的基因、蛋白質(zhì)和分子機制。科研人員通過比較不同基因型小鼠在懸掛試驗中的行為差異，揭示了與情緒調(diào)控相關(guān)的生物學(xué)基礎(chǔ)，為相關(guān)基因的功能研究提供了實驗平臺。這一綜合性的實驗方法為揭示抑郁癥的多層次機制提供了有力的工具。
實驗中常見問題及建議
1.適用動物體重： TST懸尾實驗不適宜使用較重的大鼠，因其只能通過尾巴支持體重，對其造成痛苦。同理，應(yīng)注意避免使用異常重的小鼠，例如用于模擬肥胖的小鼠，這時可尋找替代測試方法，如強迫游泳實驗。
2.適應(yīng)環(huán)境時間： 動物從居住環(huán)境帶入實驗環(huán)境后，應(yīng)適應(yīng)一段時間，通常至少一個小時。
3.環(huán)境安靜性： 實驗環(huán)境應(yīng)保持安靜，避免突然大噪音，以免小鼠驚慌失措。
4.背景對比度： 使用軟件進行分析時，選擇合適對比度的背景，白鼠使用黑色背景，黑鼠使用白色背景。
5.實驗空間設(shè)計： 每只小鼠的實驗空間建議為55cm高 * 15cm寬 * 11.5cm深左右，多通量實驗時用隔板隔開，確保動物懸掛在中央，寬度和深度足夠大，避免與墻壁接觸。
6.懸掛后鼻尖距離： 小鼠懸掛后，鼻尖與設(shè)備地板的距離建議在20~25 cm左右。
7.底部拖盤建議： 底部建議放置一個可拆卸的拖盤，以便收集糞便或尿液。
8.膠帶使用： 懸掛用的膠帶應(yīng)牢固地粘貼在小鼠尾部和懸掛桿上，足夠堅固以承受小鼠的重量。膠帶不應(yīng)過于粘滯，以免在實驗結(jié)束時給動物帶來痛苦。
9.尾巴攀爬阻止器： 尾巴攀爬現(xiàn)象可通過在小鼠尾巴周圍放置塑料管阻止器防止，該簡單而有效的方法能夠防止小鼠攀爬自己的尾巴。
10.小動作判定標(biāo)準： 分析時，僅有前肢而沒有后肢介入的小動作可判斷為不動，而由慣性產(chǎn)生的擺動可判斷為不動。
11.實驗結(jié)束膠帶處理： 實驗結(jié)束后，輕輕將膠帶從尾巴上拉下，避免從尾巴上撕扯，減少動物的不適感。
12.清潔程序：每次實驗完成后，及時收集糞便和尿液，徹底擦拭懸掛盒，保持清潔。
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